TESTI KOKKUVÕTE JA SELGITUS
Peamiselt W. bancrofti ja B. malayi põhjustatud lümfifilariaas, mida tuntakse elephantiaasi nime all, mõjutab ligikaudu 120 miljonit inimest 80 riigis.Haigus kandub inimestele edasi nakatunud sääskede hammustustega, mille sees nakatunud inimeselt imetud mikroflaariatest arenevad kolmanda staadiumi vastsed.Üldiselt on inimese nakatumise tuvastamiseks vajalik korduv ja pikaajaline kokkupuude nakatunud vastsetega.
Lõplik parasitoloogiline diagnoos on mikroflaariate demonstreerimine vereproovides.Seda kuldstandardi testi piirab aga öise verevõtu nõue ja piisava tundlikkuse puudumine.Tsirkuleerivate antigeenide tuvastamine on kaubanduslikult saadaval.Selle kasulikkus on W. bancrofti puhul piiratud.Lisaks areneb mikrofilareemia ja antigeneemia kuude kuni aastate jooksul pärast kokkupuudet.
Antikehade tuvastamine annab varajase vahendi filariaalse parasiidi infektsiooni tuvastamiseks.IgM-i olemasolu parasiidi antigeenides viitab praegusele infektsioonile, samas kui IgG vastab infektsiooni hilisele staadiumile või varasemale infektsioonile.Lisaks võimaldab konserveerunud antigeenide tuvastamine rakendada pan-filaria testi.Rekombinantsete valkude kasutamine välistab ristreaktsiooni isikutega, kellel on muid parasiithaigusi.
Filariasis IgG/IgM kombineeritud kiirtestis kasutatakse konserveeritud rekombinanti
antigeenid, et tuvastada samaaegselt W. bancrofti ja B. malayi parasiitide IgG ja IgM ilma proovide kogumist piiramata.
PÕHIMÕTE
Filariasis IgG/IgM kiirtesti komplekt on külgvoolu kromatograafiline immunoanalüüs.Testikassett koosneb: 1) Burgundia värvi konjugaatpadjast, mis sisaldab rekombinantset W. bancrofti ja B. malayi tavalisi antigeene, mis on konjugeeritud kolloidse kullaga (Filariasis konjugaadid) ja küüliku IgG-kulla konjugaatidega, 2) nitrotselluloosi membraaniribast, mis sisaldab kahte testimisriba (M) ja G-riba (a).M-riba kaetakse eelnevalt monoklonaalse inimese-vastase IgM-iga, et tuvastada IgM anti-W. bancrofti ja B. malayi, G-riba kaetakse eelnevalt reagentidega IgG anti-W tuvastamiseks.bancrofti ja B. malayi ning C-riba on eelnevalt kaetud kitse küülikuvastase IgG-ga.
Kui piisav kogus uuritavat proovi on jaotatud kasseti proovisüvendisse, liigub proov kapillaarmõjul läbi kasseti.Kui proovis esinevad W. bancrofti või B. malayi IgM antikehad, seonduvad filariaasi konjugaatidega.Seejärel haaratakse immunokompleks membraanile eelnevalt kaetud inimese IgM-vastase antikehaga, moodustades Burgundia värvi M-riba, mis näitab W. bancrofti või B. malayi IgM positiivset testi tulemust.
Kui proovis esinevad W. bancrofti või B. malayi IgG antikehad, seonduvad filariaasi konjugaatidega.Seejärel püütakse immunokompleks kinni eelnevalt kaetud reaktiividega membraanil, moodustades burgundi värvi G-riba, mis näitab W. bancrofti või B. malayi IgG positiivset testi tulemust.
Testribade (M ja G) puudumine viitab negatiivsele tulemusele.Test sisaldab sisemist kontrolli (C-riba), millel peaks olema kitse küülikuvastase IgG/küüliku IgG-kuldse konjugaadi immunokompleksi burgundi värvi vööt, olenemata värvuse kujunemisest ükskõik millisel testiribal.Vastasel juhul on testi tulemus kehtetu ja proovi tuleb teise seadmega uuesti testida.