TESTI KOKKUVÕTE JA SELGITUS
Vistseraalne leishmaniaas ehk Kala-azar on mitme L. donovani alamliigi poolt põhjustatud levinud infektsioon.Maailma Terviseorganisatsiooni (WHO) hinnangul mõjutab haigus ligikaudu 12 miljonit inimest 88 riigis.Inimestele kandub see edasi Phlebotomus sandfliesi hammustuste kaudu, kes saavad nakkuse nakatunud loomadest toitudes.Kuigi see haigus on levinud vaestes riikides, on see Lõuna-Euroopas muutunud AIDS-i patsientide seas juhtivaks oportunistlikuks nakkuseks.L. donovani organismi tuvastamine verest, luuüdist, maksast, lümfisõlmedest või põrnast annab kindla keskmise diagnoosi.Anti-L seroloogiline tuvastamine.donovani IgM on leitud olevat suurepärane marker ägeda vistseraalse leishmaniaasi korral.Kliinikus kasutatavad testid on ELISA, fluorestseeruvate antikehade või otsese aglutinatsiooni testid 4-5.Hiljuti on L. donovani spetsiifilise valgu kasutamine testis oluliselt parandanud tundlikkust ja spetsiifilisust.
Leishmania IgG/IgM kombineeritud kiirtest on rekombinantsel valgul põhinev seroloogiline test, mis tuvastab samaaegselt L. Donovani vastased IgG ja IgM antikehad.Test annab usaldusväärse tulemuse 15 minuti jooksul ilma instrumentideta.
PÕHIMÕTE
Leishmania IgG/IgM kiirtest on lateraalvoolu kromatograafiline immunoanalüüs.Testikassett koosneb: 1) Burgundia värvi konjugaatpadjast, mis sisaldab rekombinantset L. donovani antigeeni, mis on konjugeeritud kolloidse kullaga (Leishmania konjugaadid) ja küüliku IgG-kulla konjugaatidega, 2) nitrotselluloosmembraani ribast, mis sisaldab kahte testriba (T1 ja T2 ribad) ja kontrollriba (C riba).T1 riba on eelnevalt kaetud monoklonaalse inimese vastase IgM-ga, et tuvastada anti-L.donovani IgM, T2 riba on eelnevalt kaetud reaktiividega anti-L tuvastamiseks.donovani IgG ja C-riba on eelnevalt kaetud kitse küülikuvastase IgG-ga.
Kui piisav kogus uuritavat proovi on jaotatud kasseti proovisüvendisse, liigub proov kapillaarmõjul läbi kasseti.L. donovani IgM, kui see on proovis, seondub Leishmania konjugaatidega.Seejärel haaratakse immunokompleks membraanile eelnevalt kaetud inimese IgM-vastase antikehaga, moodustades burgundivärvilise T1 riba, mis näitab L. donovani IgM positiivset testi tulemust.L. donovani IgG, kui see on proovis, seondub Leishmania konjugaatidega.Seejärel püütakse immunokompleks kinni eelnevalt kaetud reaktiividega membraanil, moodustades burgundi värvi T2 riba, mis näitab L. donovani IgG positiivset testi tulemust.
T-ribade (T1 ja T2) puudumine viitab negatiivsele tulemusele.Test sisaldab sisemist kontrolli (C-riba), millel peaks olema kitse küülikuvastase IgG/küüliku IgG-kuldse konjugaadi immunokompleksi bordoopunane vööt, olenemata T-ribade värvuse kujunemisest.Vastasel juhul on testi tulemus kehtetu ja proovi tuleb teise seadmega uuesti testida.
