TESTI KOKKUVÕTE JA SELGITUS
Malaaria on sääskede kaudu leviv hemolüütiline palavikuga kulgev haigus, mis nakatab üle 200 miljoni inimese ja tapab aastas üle 1 miljoni inimese.Seda põhjustavad neli Plasmodium'i liiki: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ja P. malariae.Kõik need plasmoodiad nakatavad ja hävitavad inimese erütrotsüüte, tekitades külmavärinaid, palavikku, aneemiat ja splenomegaaliat.P. falciparum põhjustab tõsisemaid haigusi kui teised plasmodiaalsed liigid ja põhjustab enamikku malaariasurmadest.P. falciparum ja P. vivax on kõige levinumad patogeenid, kuid liikide levik on geograafiliselt väga erinev.
Traditsiooniliselt diagnoositakse malaariat organismide demonstreerimisega Giemsaga värvitud perifeerse vere paksudel määrdumisel ja plasmoodiumi eri liike eristatakse nende esinemise järgi nakatunud erütrotsüütides1.See tehnika on võimeline täpseks ja usaldusväärseks diagnoosimiseks, kuid ainult siis, kui seda teevad kogenud mikroskoobid, kasutades määratletud protokolle2, mis kujutab endast suuri takistusi maailma kaugemates ja vaestes piirkondades.
Malaria Pf / Pan Antigen Rapid Test Kit on välja töötatud nende takistuste lahendamiseks.Test kasutab paari monoklonaalseid ja polüklonaalseid antikehi P. falciparum'i spetsiifilise valgu vastu, histidiini korduvat valku II (pHRP-II) ja paari monoklonaalseid antikehi plasmodium laktaatdehüdrogenaasi (pLDH) vastu, valk, mis on toodetud nelja plasmoodiumi liigi poolt, seega võimaldab tuvastada ja simuleerida kolme erinevat P. falciparum'i nakatumist. plasmoodia.Seda võivad teha väljaõppeta või minimaalselt kvalifitseeritud töötajad ilma laboriseadmeteta.
PÕHIMÕTE
Pf/Pan Malaria kiirtesti komplekt on külgvoolukromatograafiline immunoanalüüs.Testriba komponendid koosnevad: 1) Burgundia värvi konjugaadipadjast, mis sisaldab hiire anti-pHRP-II antikeha, mis on konjugeeritud kolloidse kullaga (pHRP II-kuldkonjugaadid) ja hiire anti-pLDH antikeha, mis on konjugeeritud kolloidse kullaga (pLDH-kuldkonjugaadid),
2) nitrotselluloosmembraani riba, mis sisaldab kahte testriba (Pan ja Pv ribad) ja kontrollriba (C riba).Pan-riba on eelnevalt kaetud monoklonaalse pLDH-vastase antikehaga, mille abil saab tuvastada nakatumist mis tahes neljast plasmoodialiigist, Pf-riba on eelnevalt kaetud polüklonaalsete pHRP-II-vastaste antikehadega Pf-nakkuse tuvastamiseks ja C-riba kaetakse kitse hiirevastase IgG-ga.
Analüüsi ajal doseeritakse piisav kogus vereproovi testkasseti proovisüvendisse (S), puhveraugusse (B) lisatakse lüüsipuhver.Puhver sisaldab pesuainet, mis lüüsib punaseid vereliblesid ja vabastab erinevaid plasmoodiumi antigeene, mis migreeruvad kapillaaride toimel läbi kassetis hoitava riba.Proovis sisalduv pHRP-II seondub pHRP II-kuldkonjugaatidega.Seejärel haaratakse immunokompleks membraanile eelnevalt kaetud pHRPII-vastaste antikehadega, moodustades Burgundia värvi Pf riba, mis näitab Pf positiivset testi tulemust.Proovis sisalduv pLDH seondub pLDH kullakonjugaatidega.Seejärel haaratakse immunokompleks membraanile eelnevalt kaetud pLDH-vastase antikehaga, moodustades veinipunase värvi Pan-riba, mis näitab plasmoodiumi positiivset testi tulemust.Pan-riba puudumisel võib soovitada positiivset testi tulemust mis tahes ülejäänud kolme plasmoodia suhtes.
Testribade (Pan ja Pf) puudumine viitab negatiivsele tulemusele.Test sisaldab sisemist kontrolli (C-riba), millel peaks olema kitse hiirevastase IgG / hiire IgG (pHRP-II ja pLDH-kuldkonjugaadid) immunokompleksi burgundivärviline riba, olenemata värvuse kujunemisest mis tahes testiribal.Vastasel juhul on testi tulemus kehtetu ja proovi tuleb teise seadmega uuesti testida.
