TESTI KOKKUVÕTE JA SELGITUS
Malaaria on sääskede kaudu leviv hemolüütiline palavikuga kulgev haigus, mis nakatab üle 200 miljoni inimese ja tapab aastas üle 1 miljoni inimese.Seda põhjustavad neli Plasmodium'i liiki: P. falciparum, P. vivax, P. ovale ja P. malariae.Kõik need plasmoodiad nakatavad ja hävitavad inimese erütrotsüüte, tekitades külmavärinaid, palavikku, aneemiat ja splenomegaaliat.P. falciparum põhjustab tõsisemaid haigusi kui teised plasmodiaalsed liigid ja põhjustab enamikku malaariasurmadest.P. falciparum ja P. vivax on kõige levinumad patogeenid, kuid liikide levik on geograafiliselt väga erinev.
Traditsiooniliselt diagnoositakse malaariat organismide demonstreerimisega Giemsaga värvitud perifeerse vere paksudel määrdumisel ja plasmoodiumi eri liike eristatakse nende esinemise järgi nakatunud erütrotsüütides.See tehnika on võimeline täpseks ja usaldusväärseks diagnoosimiseks, kuid ainult siis, kui seda teevad kogenud mikroskoobid, kasutades määratletud protokolle, mis kujutab endast suuri takistusi maailma kaugemates ja vaestes piirkondades.
Malaria Pf/Pv Ag kiirtest on välja töötatud nende takistuste lahendamiseks.See kasutab P. falciparum'i histidiinirikka valgu-II (pHRP-II) ja P. vivax'i laktaatdehüdrogenaasi (Pv-LDH) spetsiifilisi antikehi, et samaaegselt tuvastada ja eristada P. falciparum'i ja P. vivaxi infektsiooni.Testi võivad teha väljaõppeta või minimaalselt kvalifitseeritud töötajad, ilma laboriseadmeteta
PÕHIMÕTE
Malaaria Pf/Pv Ag kiirtest on külgvoolu kromatograafiline immunoanalüüs.Ribatesti komponendid koosnevad: 1) Burgundia värvi konjugaadipadjast, mis sisaldab hiire anti-Pv-LDH antikeha, mis on konjugeeritud kolloidse kullaga (Pv-LDH-kuldkonjugaadid) ja hiire anti-pHRP-II antikeha, mis on konjugeeritud kolloidkullaga (pHRP-II-kuldkonjugaadid), 2) kontrollmembraanist (P-riba ja tselluloosiriba, mis sisaldab kahte riba nitro) bänd).Pv-riba kaetakse eelnevalt teise hiire anti-Pv-LDH-spetsiifilise antikehaga Pv-nakkuse tuvastamiseks, Pf-riba kaetakse polüklonaalsete anti-pHRP-II antikehadega Pf-nakkuse tuvastamiseks ja C-riba kaetakse kitse hiirevastase IgG-ga.
Analüüsi ajal doseeritakse piisav kogus vereproovi testkasseti proovisüvendisse (S), puhveraugusse (B) lisatakse lüüsipuhver.Puhver sisaldab pesuainet, mis lüüsib punaseid vereliblesid ja vabastab erinevaid antigeene, mis migreeruvad kapillaaride toimel läbi kassetis hoitava riba.Proovis sisalduv Pv-LDH seondub Pv-LDH-kulla konjugaatidega.Seejärel haaratakse immunokompleks membraanile eelnevalt kaetud anti-Pv-LDH antikehaga, moodustades Burgundia värvi Pv riba, mis näitab Pv positiivset testi tulemust.Teise võimalusena seondub proovis sisalduv pHRP-II pHRP-II-kulla konjugaatidega.Seejärel haaratakse immunokompleks membraanile eelnevalt kaetud pHRP-II-vastaste antikehadega, moodustades Burgundia värvi Pf riba, mis näitab Pf positiivset testi tulemust.Testribade puudumine viitab negatiivsele tulemusele.Test sisaldab sisemist kontrolli (C-riba), millel peaks olema kitse anti-hiire IgG / hiire IgG (anti-Pv-LDH ja anti-pHRPII)-kuldkonjugaatide immunokompleksi burgundi värvi vööt, olenemata värvuse kujunemisest mis tahes katseribal.Vastasel juhul on testi tulemus kehtetu ja proovi tuleb teise seadmega uuesti testida.
